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MSC培養(yǎng)基
大部分科研伙伴培養(yǎng)MSC會使用常規(guī)的DMEM/F12,或 a-MEM,加上胎牛血清。而對于臨床使用的胎牛血清(FBS)存在擔(dān)憂:
(1)不同批次的FBS的可變性;
(2)其定義不明確的性質(zhì);
(3)FBS含有有害污染物的可能性,如朊病毒、病毒和人畜共患病試劑。
大多數(shù)MSC培養(yǎng)通常使用胎牛血清(FBS)作為培養(yǎng)基的補(bǔ)充。然而,為了避免傳播異種傳染病和免疫的風(fēng)險,F(xiàn)BS的替代品有人血清、富血小板血漿和血小板裂解物(HPL)。
推薦產(chǎn)品:GEMINI100-512 人AB血清
血清替代物
盡管已有報道稱人類自體血清可以有效支持MSC擴(kuò)增,但是很難獲得足夠數(shù)量的這種血清來產(chǎn)生臨床相關(guān)數(shù)量的MSC,適合于小規(guī)模的科研用戶。
而人血小板裂解物(HPL)或富含血小板的血漿對MSC具有相當(dāng)大的促進(jìn)生長特性,同時保持其分化潛能和免疫調(diào)節(jié)特性。
很多培養(yǎng)干細(xì)胞需要部分生長因子,當(dāng)這些生長因子和干細(xì)胞的細(xì)胞膜上的接受體結(jié)合后,會啟動細(xì)胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)途徑,引起基因序列的表達(dá),誘導(dǎo)mRNA轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而合成各種蛋白,促進(jìn)干細(xì)胞增殖。2005年*報道人血小板裂解物(HPL)可以代替胎牛血清用于MSCs的大規(guī)模培養(yǎng)和制備,能滿足臨床應(yīng)用的需求。
當(dāng)進(jìn)行體外大規(guī)模擴(kuò)增,血小板會釋放生長因子的特性,能完美的進(jìn)行擴(kuò)增。血小板裂解物在典型的細(xì)胞培養(yǎng)基,即α-MEM中,以5%(v / v)的比例顯示MSC的生長,該培養(yǎng)基含有2mM L-谷氨酰胺作為終濃縮物 。無疑它是生產(chǎn)細(xì)胞和細(xì)胞產(chǎn)品的FBS的高效無異種替代物。
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Helios | HPCFDCRL10 | UltraGRO™-Advanced,科研級 |
Helios | HPCFDCRL50 | UltraGRO™-Advanced,科研級 |
Helios | HPCPLCGL05 | UltraGRO™,(GMP Grade) |
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定義清晰的無血清培養(yǎng)基
但是很多伙伴還是擔(dān)心風(fēng)險,所以建立GMP級SF/XF(SF:無血清,XF:無異種成份)培養(yǎng)基配方肯定會改善MSC制造系統(tǒng)在細(xì)胞質(zhì)量和均一性方面的性能,并且還可以繞過與使用FBS和人源化培養(yǎng)基相關(guān)的管理障礙,監(jiān)管機(jī)構(gòu)要求的關(guān)于細(xì)胞殘留培養(yǎng)基組分的安全性驗證的工作非常容易完成。
針對原代來源的MSC培養(yǎng)基,推薦給大家?guī)卓睿?/span>首先是我們自有甚佳品牌HY STEMCELL(人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,成分確定、無血清、無異源物),已被眾多客戶反復(fù)回購了,那么效果就不用多說啦,特別是對于臍帶和脂肪來源的MSC效果。當(dāng)然針對骨髓來源的MSC也可推薦使用StemCell MesenCultTM ,擔(dān)憂的是價格沒那么美麗了。市面上還有很多,如有需要請聯(lián)系我們。
傳代培養(yǎng)時也可使用美國Corning 88-600-CV 產(chǎn)品培養(yǎng)MSC增殖速率明顯高于在DMEM/FBS中的增殖率。
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HY STEMCELL | HX0201M | CCGmHuMTM人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,成分確定、無血清、無異源物 |
Corning | 88-600-CV | MSC xeno-free SFM |
StemCell | 05445 | StemCell MesenCultTM 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基,成分確定、無異源 |
StemCell | 05448 | StemCell MesenCultTM 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基,成分確定、無異源 |
BI | 05-200-1A | MSC無血清培養(yǎng)基 |
雖然化學(xué)成份非常清晰的無血清培養(yǎng)基能實現(xiàn)批次之間差異極少的工業(yè)化生產(chǎn),具有更好的一致性、更長的保質(zhì)期和更容易獲得,但目前藥企依然需要依賴于HPL(人血小板裂解液)或者HS(人血清)補(bǔ)充劑的使用,才能更有效地促進(jìn)MSC的大規(guī)模培養(yǎng)擴(kuò)增!
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