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間充質干細胞（MSC）如何培養(yǎng)與鑒定？相比于胚胎干細胞或神經干細胞，MSC具有易獲取、易體外培養(yǎng)、傳代穩(wěn)定性、低免疫原性等優(yōu)勢，在體外經過多次傳代后仍具有多向分化和自我復制的潛能，且MSCs多來自于成年的組織，研究過程的道德和倫理學問題較小。MSC的大小與形狀具有異質性，即不同種屬或不同組織的MSC具有不同的生長形態(tài)，例如三極形、長梭形、小圓形、短梭形和扁平形態(tài)。幾乎所有的MSC都是貼壁生長，具有較強的貼壁能力，而MSC的原代分離也正是利用了MSC強貼壁的特性。例如，骨髓MSC的分離方法為：將從組織中分離出來的單...
2020 10-30
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關于膠原酶配置后的保存方法膠原酶是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬，內含較多結締組織或膠原成分時，用胰蛋白酶解離細胞的效果較差，這時可采用膠原酶解離細胞法。膠原酶僅對細胞間質有消化作用而對上皮細胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織，可使上皮細胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為*終濃度200U/ml（約為1mg/mL）或0.03%~0.3%。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細胞膠原酶，要根據(jù)所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型...
2020 10-24
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如何配置膠原酶膠原酶按其存在的方式不同可分為人體內源性膠原酶和藥用膠原酶兩種。人體內源性膠原酶是指人體內部本身所具有的膠原酶，如牙齦、觸膜等上皮組織和關節(jié)滑膜、椎間盤內都不同程度的存在著這種膠原酶，它在體內膠原蛋白的分解過程中發(fā)揮著*的作用。藥用膠原酶是指利用生物制藥的高科技手段從溶組織梭狀芽孢桿菌的發(fā)酵液中提取、純化并精制而得的白色或類白色無菌凍干粉針生物制劑。膠原酶（collagenase）是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬，內含較...
2020 10-20
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WGA技術如何選擇？單細胞全基因組測序技術是在單細胞水平對全基因組進行擴增與測序的一項技術，其原理是對分離的單個細胞的微量全基因組DNA進行擴增，獲得高覆蓋率的完整的基因組后進行高通量測序，廣泛應用于癌癥研究、胚胎發(fā)育、輔助生殖、細胞分化、免疫機制、微生物等方向的研究。獲得高覆蓋度高保真性的全基因組擴增產物是準確全面的測序結果的保障。為了保證基因組高覆蓋度無偏好性的擴增，在單細胞測序技術誕生的近二十年時間里，全基因組擴增技術經歷了幾次重大的變革，WGA主要有三種方式：DOP-PCR，MDA，MA...
2020 10-16
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膠原酶的使用膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶，它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構，而不損傷其它蛋白質和組織。膠原酶的化學本質是一種蛋白質，因此，它對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質。膠原酶是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬，內含較多結締組織或膠原成分時，用胰蛋白酶解離細胞的效果較差，這時可采用膠原酶解離細胞法。膠原酶僅對細胞間質有消化作用而對上皮...
2020 10-16
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當ThruPLEX技術遇上FFPE樣本，會帶來怎樣的“*操作”！FormalinFixedａndParaffinEmbeddedFFPE樣本作為生物和醫(yī)學領域的重要樣本來源，廣受研究者的青睞。由于樣本固定和儲存過程中，容易發(fā)生核酸的降解和損傷，因此獲得符合測序質量要求的文庫通常很具有挑戰(zhàn)性。那么面對做DNA-Seq的FFPE樣本，應該如何應對呢？“想要隨心所欲的進行FFPE-DNA樣本文庫構建”，這個神器值得擁有?【SMARTerThruPLEXDNA-SeqKit】“飛一般感覺”的操作FFPE樣本珍貴，擔心在文庫制備時損失？選擇它吧。該...
2020 10-12
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病原微生物NGS解決方案來了，您準備好項目了嗎？病原微生物NGS解決方案來了，您準備好項目了嗎？人類與感染性疾病的戰(zhàn)斗持續(xù)了幾千年。但自17世紀列文虎克用顯微鏡觀察到微生物后，人類才逐漸認知到了感染性疾病是由病原微生物導致，逐步開啟了病原微生物的研究。主要的研究方法包括經典的培養(yǎng)鑒定法、實時熒光定量PCR法、NGS分析、質譜分析等多種方法。其中NGS由于可直接從宿主中快速而正確地檢測鑒別病原體的全基因組序列，以及通量高、數(shù)據(jù)庫全等特點，逐漸成為微生物研究領域的重要方法，并為后續(xù)實現(xiàn)對感染性疾病診斷、治療及預防提供技術保障。...
2020 10-12
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Takara真香推薦—簡便好用的液態(tài)活檢解決方案之游離DNA篇在腫瘤早期篩查研究領域，循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）一直是各大廠商、科研工作者關注的重點。雖然ctDNA的應用日趨成熟，但總有一些微量的ctDNA樣本無法用傳統(tǒng)技術完成高品質文庫的構建，特別是在進行腫瘤早期診斷有重要價值的稀有突變分析時。如何以微量ctDNA起始構建可準確分析稀有突變的文庫？Takara的解決方案是引入分子標簽技術！■微量ctDNA樣本無法準確分析稀有變異?自帶1600萬分子標簽的建庫技術了解一下ThruPLEXTag-SeqKit是Takara推出的采用莖環(huán)...
2020 10-12
